02 Da análise de esporos à identificação precisa
Limitações de identificação de macro
Na natureza, muitas espécies de cogumelos parecem extremamente semelhantes, mas sua comestível e toxicidade podem variar bastante.Tomando o gênero Amanita como exemplo, alguns cogumelos venenosos mortais são quase indistinguíveis de espécies comestíveis de maneira macroscópica.Os micro características fornecem uma base indiscutível para identificação, especialmente para as espécies com aparências semelhantes.
Caso prático: desafio de identificação de Amanita
Certa vez, encontrei um caso típico no noroeste do Pacífico dos Estados Unidos: dois colecionadores experientes têm um desacordo sobre se um cogumelo branco é comestível.Macroscópico, parece uma Amanita Lanei comestível, mas a análise de esporos no microscópio mostra que na verdade é um cogumelo de anjo fatal (Amanita Bisporigera). Este exemplo ilustra vividamente como a identificação microscópica salva vidas.
Base científica
A taxonomia fúngica depende cada vez mais de características microscópicas.A morfologia de esporos, a estrutura cística e as características miceliais fornecem dados taxonômicos confiáveis que são relativamente estáveis e não afetados por fatores ambientais.
Estratégia de seleção de microscopia
Os microscópios ópticos compostos são a ferramenta principal e a ampliação deve estar na faixa de 400-1000 vezes.Para iniciantes, recomendo biomicroscópios de nível básico, que custam entre US $ 300 e 500 para atender às necessidades básicas.Mais pesquisas profissionais podem exigir mais de US $ 2.000 modelos, equipados com espelhos de óleo e sistemas ópticos mais avançados.
Recomendação de especialistas: Encontre modelos com condensador ABE e estágio mecânico, que são extremamente importantes ao observar pequenas estruturas.
Lista de acessórios essenciais
- Slides e lamelas: Prepare várias espessuras (No.1 e No.1.5) para se adequar a diferentes microscópios
- Conjunto manchado: incluindo Melzer Reagent, Congo Red, 5% de solução KOH
- micrômetro ocular: usado para medir com precisão o tamanho do esporo
- Ferramentas anatômicas: agulhas anatômicas, lâminas afiadas (lâminas de cirurgia são as melhores)
- Caderno de laboratório: Recordes de observação Resultados em detalhes
Dicas rápidas: Você não precisa comprar todos os equipamentos profissionais no início, e a configuração básica é suficiente para identificar os cogumelos mais comuns.
Produção de impressão de esporos: a combinação de ciência e arte
Tecnologia de impressão de esporos otimizados
A impressão de esporos não apenas fornece informações de cores de esporos, mas também obtém um grande número de esporos para observação da microscopia.As melhorias tradicionais incluem:
1. Escolha uma cobertura madura, mas não totalmente expandida
2. Use papel meio branco e meio preto para facilitar a observação de esporos de várias cores
3. Cubra a tigela de vidro para evitar a secagem do ar, mas deixe pequenas lacunas para permitir circulação moderada de ar
4. Deixe em temperatura ambiente por 6-24 horas, o tempo específico depende do tipo de cogumelo
Habilidades práticas: Para espécies difíceis de produzir esporos, tente aumentar a umidade no contêiner ou coloque a tampa bacteriana na folha de alumínio em vez de papel para facilitar a coleta subsequente de esporos.
Classificação da cor do esporo
A cor do esporo é um indicador importante da classificação de cogumelos:
- Branco: cores comuns de Amanita, Russula, etc.
- rosa: cor característica de Pluteus
- Brown: incluindo vários tons, é a característica de muitas bactérias porosas
- marrom-púrpura: cores típicas de psilocybe
- Black: Características do gênero Coprinus e outro gênero
Os especialistas recomendam: Observe a cor do esporo sob luz natural, as fontes de luz artificial podem mudar a percepção de cores.
Tecnologia de amostragem profissional
Ao amostrar da impressão de esporos, mergulhe suavemente os esporos usando uma ponta de agulha de dissecção úmida.Se a amostra diretamente das dobras bacterianas, raspe cuidadosamente uma pequena quantidade de esporos sem destruir a estrutura da dobra bacteriana.Para bactérias porosas, foram coletadas amostras dos poços do tubo.
Método de otimização de imagem
1. Adicione uma pequena gota de água destilada ou solução de KOH a 5% no centro do slide
2. Dispersa suavemente a amostra de esporos nas gotículas
3. Abaixe lentamente a lamela em um ângulo de cerca de 45 graus para evitar bolhas
4. Use um tecido para sugar o excesso de líquido
Erros comuns: O uso de muitas amostras pode levar a camadas celulares muito grossas e difícil de focar.Amostras esparsas geralmente fornecem observações mais claras.
Processo de observação do sistema
1. Use um espelho de baixa potência (100x) para localizar a amostra e a estrutura geral primeiro
2. Mude para o espelho de alta potência (400x) para observar detalhes
3. Use um espelho de óleo (1000X) para observar as estruturas finas, como padrões de superfície de esporos e outros aspectos.
Análise de características de esporos
Classificação de forma
- Esférico: completamente redondo, como algumas espécies de Amanita
- Oval: a proporção é de cerca de 1,5: 1, comumente encontrada em muitos vermes de tomate
- cilíndrico: o comprimento é significativamente maior que a largura
- Forma de amêndoa: apontado para as duas extremidades, largo no meio
- Eixo: largo no meio, fino nas duas extremidades
Tecnologia de medição precisa
20-30 esporos maduros foram medidos usando um microscópio ocular calibrado e o comprimento e a largura foram registrados.Calcule a média e o alcance para excluir esporos significativamente imaturos ou deformados.
Dicas profissionais: O tamanho do esporo também varia dentro da mesma espécie. A medição de vários esporos pode obter dados mais precisos.
Identificação do padrão de superfície
- suave: sem saliências na superfície
-verruga: saliências irregulares de verruga
- Pierced: com saliências cravadas
- Padrão reticular: com padrão reticular
Observação de estrutura especial
- Bud Pore: Área fina na parede de esporos, quebrando daqui quando a germinação
- Gotas de óleo: substâncias de armazenamento em esporos, que têm valor de identificação em certos tipos
Explicação detalhada do tipo de corpo cístico
O corpo cístico é uma célula especializada nas bordas ou lados dos babados bacterianos, com morfologia extremamente diversa:
- Pleurocistídios: localizado na lateral das dobras bacterianas, com várias formas
- Cheilocistidia: Localizado na borda de babados bacterianos, o que é crucial para a identificação de muitos gêneros
Aplicação prática: A identificação do gênero Psilocybe é extremamente dependente das características da cápsula, e a identificação correta pode estar relacionada a questões legais e de segurança.
Otimização do método de observação
A preparação de seções finas de dobras bacterianas requer prática e paciência:
1. Corte um pequeno pedaço de bactéria com uma lâmina afiada
2. Coloque -o no slide e separe -o com uma agulha de dissecção
3. Adicione o meio apropriado (água ou koh)
4. Cubra a lamela e pressione suavemente para tornar a amostra fina.
Os especialistas recomendam: Use lâminas de dupla face para preparar fatias mais finas para melhorar a qualidade da observação.
Identificação do tipo my -hypha
- Micélio reprodutivo: há um diafragma, que pode ter uma articulação travada, responsável pela produção de esporos
- Micélio do esqueleto: paredes grossas, fornecendo suporte estrutural
- Combinado com micélio: parede fina, reproduz uma função de conexão
A importância da união em forma de bloqueio
A combinação clonada é uma estrutura característica de certos bacidióides, manifestada como um pequeno laço na junção das células.Sua presença ou ausência é um importante recurso de classificação.
Técnicas de observação: Rasgue as folhas de tecido extremamente finas do interior da tampa ou caules e as coloque na solução KOH para observar.
Guia de aplicação de reagente Melzer
O reagente de Melzer (solução de iodeto-iodo de potássio) é usado para detectar a reação de amido:
- reação amido: azul escuro ou preto roxo
- Reação não de amido: ficar amarelado ou inalterado
-Reação do tipo amido: Torne-se marrom-avermelhado
Aplicação prática
A identificação do gênero Russula e Lactarius depende muito da resposta de Melzer.Por exemplo, a maioria das espécies de esporos de gênero Russula reage em amido, enquanto os esporos de Láctarius geralmente não são de amido.
Dicas de segurança: O reagente Melzer é tóxico, use luvas durante a operação e se apresenta em um local bem ventilado.
Classificação do tipo epidérmico
- colcha de cera (ixocutis): cobertura da camada de glúten
- Trichoderm: composto por micélio ereto
- Palisadoderm: arranjo vertical das células
- Epitélio: consiste em células esféricas ou elípticas
Método de observação
Corte as fatias da borda da tampa e tente incluir a camada de superfície e uma pequena quantidade de tecido subjacente.Para a camada coloidal, o KOH pode ser necessário para ajudar a limpar.
Método de sete etapas perfeito para produção
1. Limpe os slides e lamelas
2. Selecione o meio direito (água, koh ou outro)
3. Amostra e distribua adequadamente
4. Cubra cuidadosamente a lampes
5. Remova bolhas (toque na lamela)
6. Sucule o excesso de líquido
7. Selo da borda (para armazenamento a longo prazo)
Otimização da tecnologia de tingimento
- Congo Red: Aumente a visibilidade das paredes de micélio e esporos
- Algodão azul: especialmente adequado para observar padrões finos
- Melzer Reagent: Usado diretamente em esporos ou tecidos
Dicas de especialistas: Para estruturas difíceis de durar, tente limpá-las com KOH primeiro e depois aplique um corante.
Protocolo de medição preciso
1. Calibre o micrômetro antes de cada uso
2. Meça esporos em vários campos de visão
3. Registre valores máximos, mínimos e médios
4. Preste atenção às condições de medição (mídia, ampliação)
Modelo de registro do sistema
Crie formulários de registro padronizados, incluindo:
- Coleta de dados (data, localização, habitat)
- Descrição do recurso macroeconômico
- Registro de Micro Recursos detalhados
- Resultados da reação química
- Fotos ou desenhos de alta qualidade
Guia técnico de fotografia
O preço das câmeras modernas de microscópio caiu significativamente e os adaptadores de smartphones também podem obter bons resultados.Habilidades de tiro de chaves:
- Use iluminação uniforme
- Tire várias fotos em diferentes aviões focais
- Inclui escala
- Parâmetros de tiro recordes
Aplicativo de ferramentas digitais
O software de análise de imagem foi usado para medir tamanhos de esporos e observar registros usando o gerenciamento de banco de dados.Plataformas como o observador inaturalista e de cogumelos podem compartilhar descobertas e se comunicar com especialistas.
Concentre -se em dificuldades
- Motivo: a amostra é muito grossa
- Solução: prepare fatias mais finas, ajuste o condensador
Problema de bolha
- Prevenção: abaixe lentamente a lamela em ângulo
- Solução: toque na lamela ou use a ponta da agulha para guiar as bolhas para escapar
esporos esparsos
- Estratégia: pegue amostras de diferentes partes várias vezes
- Dicas: Use impressão de esporos em vez de amostragem direta
Medição inconsistente
- Melhoria: Aumente o número de medições (mais de 30)
- padronização: condições e métodos de medição fixa
Microscópio eletrônico de varredura (SEM)
Fornece detalhes incríveis da superfície, mas são caros e requer preparação profissional. Uma universidade ou instituição de pesquisa pode fornecer serviços pagos.
Microscópio de fluorescência **
Corantes fluorescentes específicos podem destacar estruturas difíceis de observar na microscopia convencional.
Microscópio de contraste de fase
Melhore o contraste de estruturas transparentes e observe amostras vivas sem manchas.
Identificação precisa de espécies semelhantes
Por exemplo, distinguindo moros comestíveis (morels) de espécies tóxicas de giromitra, as características microscópicas fornecem evidências decisivas.
Nova descoberta e descrição
As características microscópicas são um componente essencial na descrição de novas espécies fúngicas.Os entusiastas também devem descobrir novas espécies por meio de observações microscópicas cuidadosas.
Avaliação de toxicidade
Alguns cogumelos tóxicos têm características microscópicas únicas, como as características dos esporos da Galerina são significativamente diferentes das de Psilocybe.
Plano de aprendizagem progressiva etail
1. Comece com tipos comuns com características microscópicas óbvias
2. Gradualmente, desafie casos de identificação mais complexos
3. Participe de seminários microscópicos das sociedades de fungos locais
4. Interaja com micólogos experientes
Recomendação de recursos
- Livros: "Um guia para o campo dos identificadores de cogumelos", "Características microscópicas do fungo"
- Recursos online: especialista em cogumelos, mycokey e outros sites
- Comunidade: Sociedade Fungal da América do Norte, Organização Micológica Local
A prática é mais importante que a teoria
Passe pelo menos algumas horas por semana para praticar microscopia, registrar continuamente observações e compará -las com amostras conhecidas.
Microscopia não é uma necessidade, mas ferramentas de valor agregado
Os cogumelos comestíveis mais comuns podem ser identificados com segurança através de características macro.A microscopia é uma ferramenta para melhorar as habilidades e o entendimento, não um requisito de nível básico.
Seleção para iniciantes
Um microscópio ao preço de US $ 200 a 500 é suficiente para a maioria das necessidades amadoras.O mercado de segunda mão também pode encontrar equipamentos de boa qualidade.
Recursos compartilhados
Uma sociedade de fungos local, faculdade comunitária ou centro natural pode oferecer oportunidades para uso de microscopia.
Use recursos existentes
Já existe um grande número de fotos microscópicas de alta qualidade na Internet que podem ser usadas para aprender e comparar.
1. Equipamento básico : Invista em um microscópio de qualidade e acessórios básicos
2. Comece com simplicidade : Escolha espécies comuns com esporos óbvios para a primeira tentativa
3. Aprendizagem do sistema : dominar a produção de impressão de esporos e técnicas básicas de produção
4. Record Practice : Registre cada observação em detalhes e estabeleça um banco de dados pessoal
5. Junte -se à comunidade : Interaja com outros entusiastas, participe de workshops e incursões
O mundo microscópico fornece uma perspectiva única sobre a compreensão de cogumelos.Ao dominar essas habilidades, você pode não apenas melhorar a precisão da identificação, mas também explorar os mistérios do reino fúngico em profundidade.Lembre-se de que as habilidades profissionais vêm da prática contínua-inicie sua jornada de micro-exploração hoje.