02 El mundo microsc贸pico de la identificaci贸n de hongos
Limitaciones de la identificaci贸n macro
En la naturaleza, muchas especies de hongos se ven extremadamente similares, pero su comestible y toxicidad pueden variar mucho.Tomando el g茅nero Amanita como ejemplo, algunos hongos venenosos mortales son casi indistinguibles de las especies comestibles de manera macrosc贸pica.Las micro caracter铆sticas proporcionan una base indiscutible para la identificaci贸n, especialmente para aquellas especies con apariencias similares.
Caso pr谩ctico: desaf铆o de identificaci贸n de Amanita
Una vez encontr茅 un caso t铆pico en el noroeste del Pac铆fico de los Estados Unidos: dos coleccionistas experimentados tienen un desacuerdo sobre si un hongo blanco es comestible.Macrosc贸pico, parece un Amanita Lanei comestible, pero el an谩lisis de esporas bajo microscopio muestra que en realidad es un hongo de 谩ngel fatal (Amanita bisporigera). Este ejemplo ilustra v铆vidamente c贸mo la identificaci贸n microsc贸pica salva vidas.
Base cient铆fica
La taxonom铆a f煤ngica depende cada vez m谩s de las caracter铆sticas microsc贸picas.La morfolog铆a de las esporas, la estructura qu铆stica y las caracter铆sticas miceliales proporcionan datos taxon贸micos confiables que son relativamente estables y no afectados por los factores ambientales.
Estrategia de selecci贸n de microscop铆a
Los microscopios 贸pticos compuestos son la herramienta central, y el aumento debe estar en el rango de 400-1000 veces.Para principiantes, recomiendo biomicroscopios de nivel de entrada, que cuestan entre $ 300-500 para satisfacer las necesidades b谩sicas.Una investigaci贸n m谩s profesional puede requerir m谩s de $ 2,000 modelos, equipados con espejos de aceite y sistemas 贸pticos m谩s avanzados.
Recomendaci贸n de expertos: Encuentre modelos con condensador ABE y etapa mec谩nica, que son extremadamente importantes al observar estructuras peque帽as.
Lista de accesorios esenciales
- Diapositivas y cubreobjetos: prepare m煤ltiples espesores (No.1 y No.1.5) para adaptarse a diferentes microscopios
- Conjunto de estancos: incluyendo reactivo Melzer, Red Congo, soluci贸n KOH al 5%
- Micr贸metro de ocular: se utiliza para medir con precisi贸n el tama帽o de la espora
- Herramientas anat贸micas: agujas anat贸micas, cuchillas afiladas (las cuchillas de la cirug铆a son las mejores)
- Notebook de laboratorio: la observaci贸n de registro da como resultado en detalle
Consejos r谩pidos: No necesita comprar todos los equipos profesionales al principio, y la configuraci贸n b谩sica es suficiente para identificar los hongos m谩s comunes.
Tecnolog铆a de impresi贸n de esporas optimizada
La impresi贸n de esporas no solo proporciona informaci贸n de color de esporas, sino que tambi茅n obtiene una gran cantidad de esporas para la observaci贸n de microscop铆a.Las mejoras tradicionales incluyen:
1. Elija una cubierta madura pero no completamente ampliada
2. Use papel medio blanco y medio negro para facilitar la observaci贸n de esporas de varios colores
3. Cubra el taz贸n de vidrio para evitar el secado del aire, pero deje peque帽os huecos para permitir la circulaci贸n moderada de aire
4. D茅jelo a temperatura ambiente durante 6-24 horas, el tiempo espec铆fico depende del tipo de hongo
Habilidades pr谩cticas: Para especies que son dif铆ciles de producir esporas, intentan aumentar la humedad en el contenedor o colocar la tapa bacteriana en papel de aluminio en lugar de papel para facilitar la recolecci贸n posterior de esporas.
Clasificaci贸n del color de esporas
El color de las esporas es un indicador importante de la clasificaci贸n de hongos:
- Blanco: colores comunes de Amanita, Russula, etc.
- Pink: el color caracter铆stico de Pluteus
- Brown: incluyendo varios tonos, es la caracter铆stica de muchas bacterias porosas
- P煤rpura-marr贸n: colores t铆picos de psilocybe
- Negro: caracter铆sticas del g茅nero Corrino y otro g茅nero
Los expertos recomiendan: Observe el color de las esporas bajo luz natural, las fuentes de luz artificial pueden cambiar la percepci贸n del color.
Tecnolog铆a de muestreo profesional
Cuando se muestrean desde la impresi贸n de esporas, sumerja suavemente las esporas con una punta de aguja de disecci贸n h煤meda.Si se muestrean directamente desde los pliegues bacterianos, raspe cuidadosamente una peque帽a cantidad de esporas sin destruir la estructura de pliegue bacteriano.Para las bacterias porosas, se tomaron muestras de los pozos del tubo.
M茅todo de optimizaci贸n de im谩genes
1. Agregue una peque帽a gota de agua destilada o soluci贸n de KOH al 5% en el centro del portaobjetos
2. Disperse suavemente la muestra de esporas en las gotas
3. Baje lentamente la cubreobjetos en un 谩ngulo de aproximadamente 45 grados para evitar burbujas
4. Use un tejido para absorber el exceso de l铆quido
Errores comunes: El uso de demasiadas muestras puede conducir a capas de celdas demasiado gruesas y dif铆cil de concentrar.Las muestras escasas generalmente proporcionan observaciones m谩s claras.
Proceso de observaci贸n del sistema
1. Use un espejo de baja potencia (100x) para localizar primero la muestra y la estructura general
2. Cambie al espejo de alta potencia (400x) para observar detalles
3. Use un espejo de aceite (1000X) para observar las estructuras finas, como los patrones de superficie de esporas y otros aspectos.
An谩lisis de caracter铆sticas de esporas
Clasificaci贸n de forma
- Esf茅rico: completamente redondo, como algunas especies de Amanita
- La relaci贸n ovalada: de aspecto es de aproximadamente 1.5: 1, com煤nmente encontrada en muchos gusanos de tomate
- cil铆ndrico: la longitud es significativamente mayor que el ancho
- Forma de almendras: apunta en ambos extremos, de ancho en el medio
- eje: ancho en el medio, delgado en ambos extremos
Tecnolog铆a de medici贸n precisa
Se midieron 20-30 esporas maduras utilizando un microscopio de ocular calibrado, y se registraron longitud y ancho.Calcule la media y el rango para excluir las esporas que son significativamente inmaduras o deformadas.
Consejos profesionales: El tama帽o de la espora tambi茅n var铆a dentro de la misma especie. La medici贸n de m煤ltiples esporas puede obtener datos m谩s precisos.
Identificaci贸n del patr贸n de superficie
- suave: no hay protuberancias en la superficie
-como verruga: protuberancias irregulares similares a la verruga
- perforado: con protuberancias con p煤as
- Patr贸n reticular: con patr贸n reticular
Observaci贸n de estructura especial
- Bud Pore: 谩rea delgada en la pared de esporas, rompiendo desde aqu铆 cuando la germinaci贸n
- Gotas de aceite: sustancias de almacenamiento en esporas, que tienen valor de identificaci贸n en ciertos tipos
Explicaci贸n detallada del tipo de cuerpo qu铆stico
El cuerpo qu铆stico es una c茅lula especializada en los bordes o lados de los adornos bacterianos, con una morfolog铆a extremadamente diversa:
- Pleurocistidia: ubicado en el costado de los pliegues bacterianos, con varias formas
- Cheilocistidios: ubicado en el borde de los adornos bacterianos, que es crucial para la identificaci贸n de muchos g茅neros
Aplicaci贸n pr谩ctica: La identificaci贸n del g茅nero Psilocybe depende extremadamente de las caracter铆sticas de la c谩psula, y la identificaci贸n correcta puede estar relacionada con problemas legales y de seguridad.
Optimizaci贸n del m茅todo de observaci贸n
La preparaci贸n de secciones delgadas de pliegues bacterianos requiere pr谩ctica y paciencia:
1. Corta un peque帽o trozo de bacteria con una cuchilla afilada
2. Col贸quelo en el portaobjetos y separe suavemente con una aguja de disecci贸n
3. Agregue medio apropiado (agua o koh)
4. Cubra el cubreobjetos y presione suavemente para adelgazar la muestra.
Los expertos recomiendan: Use cuchillas de doble cara para preparar rebanadas m谩s delgadas para mejorar la calidad de la observaci贸n.
Identificaci贸n de tipo myhypha
- Micelio reproductivo: hay un diafragma, que puede tener una articulaci贸n bloqueada, responsable de la producci贸n de esporas
- Skeleton Mycelium: paredes gruesas, proporcionando soporte estructural
- Combinado con micelio: la pared delgada, reproduce una funci贸n de conexi贸n
La importancia de la uni贸n en forma de bloqueo
La combinaci贸n clonada es una estructura caracter铆stica de ciertos bacidioides, manifestados como un bucle peque帽o en la uni贸n de las c茅lulas.Su presencia o ausencia es una caracter铆stica de clasificaci贸n importante.
T茅cnicas de observaci贸n: Rague las l谩minas de tejido extremadamente delgadas desde el interior de la tapa o el tallo y col贸quelas en soluci贸n KOH para observar.
Gu铆a de aplicaci贸n de reactivos de Melzer
El reactivo de Melzer (soluci贸n de yoduro de potasio-yodo) se usa para detectar la reacci贸n de almid贸n:
- Reacci贸n con almid贸n: azul oscuro o negro morado
- Reacci贸n no escolar: gire amarillento o sin cambios
-Reacci贸n similar a un almid贸n: gira de color marr贸n rojizo
Aplicaci贸n pr谩ctica
La identificaci贸n del g茅nero Russula y Lactarius depende en gran medida de la respuesta de Melzer.Por ejemplo, la mayor铆a de las especies del g茅nero russula las esporas reaccionan en almid贸n, mientras que las esporas de Lactarius suelen ser no abastecidas.
Consejos de seguridad: El reactivo Melzer es t贸xico, los guantes de desgaste durante la operaci贸n y act煤an en un lugar bien ventilado.
Clasificaci贸n de tipo epid茅rmico
- Edred贸n de cera (Ixocutis): cubierta de la capa de gluten
- Trichoderm: compuesto de micelio erecto
- Palisadoderm: disposici贸n vertical de c茅lulas
- Epitelio: consiste en c茅lulas esf茅ricas o el铆pticas
M茅todo de observaci贸n
Corte las rodajas del borde de la tapa e intente incluir la capa superficial y una peque帽a cantidad de tejido subyacente. Para la capa coloidal, se puede requerir KOH para ayudar a limpiar.
M茅todo perfecto de siete pasos para la producci贸n
1. Limpie los toboganes y los cubreobjetos
2. Seleccione el medio derecho (agua, koh u otro)
3. Muestra y distribuyendo adecuadamente
4. Cubra cuidadosamente el cubreobjetos
5. Retire las burbujas (toque el cubreobjetos)
6. Sucia el exceso de l铆quido
7. Sello desde el borde (para el almacenamiento a largo plazo)
Optimizaci贸n de tecnolog铆a de te帽ido
- Congo rojo: mejorar la visibilidad de las paredes de micelio y esporas
- Azul de algod贸n: especialmente adecuado para observar patrones finos
- Reactivo Melzer: se usa directamente en esporas o tejidos
Consejos de expertos: Para estructuras dif铆ciles de tinte, intente limpiarlas primero con KOH y luego aplique un tinte.
Protocolo de medici贸n preciso
1. Calibre el micr贸metro antes de cada uso
2. Medir esporas en m煤ltiples campos de visi贸n
3. Registro de valores m谩ximos, m铆nimos y promedio
4. Presta atenci贸n a las condiciones de medici贸n (medios, aumento)
Plantilla de registro del sistema
Crear formularios de registro estandarizados, que incluyen:
- Recopilaci贸n de datos (fecha, ubicaci贸n, h谩bitat)
- Descripci贸n de la caracter铆stica macroecon贸mica
- Registro detallado de micro caracter铆sticas
- Resultados de la reacci贸n qu铆mica
- Fotos o dibujos de alta calidad
Gu铆a t茅cnica de fotograf铆a
El precio de las c谩maras modernas de microscopio se ha reducido significativamente, y los adaptadores de tel茅fonos inteligentes tambi茅n pueden lograr buenos resultados.Habilidades de disparo clave:
- Use iluminaci贸n uniforme
- Tome m煤ltiples fotos en diferentes planos focales
- Incluye escala
- Registro de par谩metros de disparo
Aplicaci贸n de herramientas digitales
El software de an谩lisis de im谩genes se utiliz贸 para medir los tama帽os de esporas y observar registros utilizando la gesti贸n de bases de datos.Plataformas como Inaturalist y Mushroom Observer pueden compartir descubrimientos y comunicarse con expertos.
Centrarse en las dificultades
- Raz贸n: la muestra es demasiado gruesa
- Soluci贸n: prepare rodajas m谩s delgadas, ajuste el condensador
Problema de burbujas
- Prevenci贸n: baje lentamente el cubreobjetos en 谩ngulo
- Soluci贸n: toque el cubreobjetos o use la punta de la aguja para guiar las burbujas para escapar
esporas escasas
- Estrategia: tome muestras de diferentes partes varias veces
- Consejos: use la impresi贸n de esporas en lugar de muestreo directo
Medici贸n inconsistente
- Mejora: aumente el n煤mero de mediciones (m谩s de 30)
- Estandarizaci贸n: condiciones y m茅todos de medici贸n fijos
Microscopio electr贸nico de barrido (SEM)
Proporciona detalles de superficie incre铆bles, pero son caros y requieren una preparaci贸n profesional. Una universidad o instituci贸n de investigaci贸n puede proporcionar servicios pagos.
Microscopio de fluorescencia
Los tintes fluorescentes espec铆ficos pueden resaltar estructuras que son dif铆ciles de observar en la microscop铆a convencional.
Microscopio de contraste de fase
Mejore el contraste de las estructuras transparentes y observe muestras vidas sin manchas.
Identificaci贸n precisa de especies similares
Por ejemplo, distinguir las morillas comestibles (Moreles) de las especies t贸xicas de Gyromitra, las caracter铆sticas microsc贸picas proporcionan evidencia decisiva.
Nuevo descubrimiento y descripci贸n
Las caracter铆sticas microsc贸picas son un componente esencial para describir nuevas especies f煤ngicas.Es probable que los aficionados tambi茅n descubran nuevas especies a trav茅s de observaciones microsc贸picas cuidadosas.
Evaluaci贸n de toxicidad
Algunos hongos t贸xicos tienen caracter铆sticas microsc贸picas 煤nicas, como las caracter铆sticas de las esporas de Galerina son significativamente diferentes de las de Psilocybe.
Plan de aprendizaje progresivo pasado
1. Comience con tipos comunes con caracter铆sticas microsc贸picas obvias
2. Desaf铆e gradualmente los casos de identificaci贸n m谩s complejos
3. Participe en seminarios microsc贸picos de sociedades de hongos locales
4. Interactuar con mic贸logos experimentados
Recomendaci贸n de recursos
- Libros: "Una gu铆a del campo de los identificadores de hongos", "Caracter铆sticas microsc贸picas del hongo"
- Recursos en l铆nea: experto en hongos, mycokey y otros sitios web
- Comunidad: North American Fungal Society, Organizaci贸n Micol贸gica local
La pr谩ctica es m谩s importante que la teor铆a
Pase al menos unas pocas horas a la semana para practicar microscop铆a, registrar continuamente observaciones y compararlas con muestras conocidas.
La microscop铆a no es una necesidad sino herramientas de valor agregado
Los hongos comestibles m谩s comunes se pueden identificar de manera segura a trav茅s de las caracter铆sticas macro.La microscop铆a es una herramienta para mejorar las habilidades y la comprensi贸n, no un requisito de nivel de entrada.
Selecci贸n para principiantes
Un microscopio a un precio de $ 200-500 es suficiente para la mayor铆a de las necesidades aficionadas.El mercado de segunda mano tambi茅n puede encontrar equipos de buena calidad.
Recursos compartidos
Una sociedad f煤ngica local, una universidad comunitaria o un centro de la naturaleza puede brindar oportunidades para el uso de microscop铆a.
Use los recursos existentes
Ya hay una gran cantidad de fotos microsc贸picas de alta calidad en Internet que se pueden usar para el aprendizaje y la comparaci贸n.
1. Equipo b谩sico : Invierta en un microscopio de calidad y accesorios b谩sicos
2. Comience con simplicidad : Elija especies comunes con esporas obvias para el primer intento
3. Aprendizaje del sistema : Dominar la producci贸n de impresi贸n de esporas y t茅cnicas de producci贸n b谩sicas
4. Pr谩ctica de registro : Registre cada observaci贸n en detalle y establece una base de datos personal
5. 脷nete a la comunidad : Interact煤a con otros entusiastas, participe en talleres y incursiones
El mundo microsc贸pico proporciona una perspectiva 煤nica sobre la comprensi贸n de los hongos.Al dominar estas habilidades, no solo puede mejorar la precisi贸n de la identificaci贸n, sino tambi茅n explorar los misterios del reino f煤ngico en profundidad.Recuerde, las habilidades profesionales provienen de la pr谩ctica continua: comience su viaje de microexploraci贸n hoy.